检验科医用显微镜样品制备关键技巧分享

在临床检验、病理诊断及疾病筛查中，检验科医用显微镜作为细胞形态学分析的核心工具，其样品制备质量直接影响诊断准确性。本文聚焦医学检验场景下的通用制备技术，提炼可复用的实操策略，助力检验人员提升检测效率与结果可靠性。

一、样品采集与预处理：保障样本原始性

临床样本（如血液、尿液、痰液）需严格遵循无菌采集规范。血液样本推荐使用EDTA抗凝管避免凝血干扰，采集后需在2小时内完成涂片制备；尿液样本需离心取沉渣，避免结晶或上皮细胞过度溶解；痰液样本需通过生理盐水稀释并过滤，去除黏液杂质。预处理时需控制温度（18—25℃），避免低温导致细胞收缩或高温导致蛋白变性。

二、涂片制备：优化细胞分布与形态保留

涂片质量直接影响显微观察效果。血液涂片推荐采用“推片法”：取微量血液置于载玻片一端，用另一载玻片以30—45度角平稳推展，形成“舌状”薄层，确保细胞均匀分布且无重叠；体液涂片（如胸腹水）需采用“离心浓缩+定量涂片”策略，通过离心富集细胞后，用微量移液器定量滴加至载玻片，避免样本浪费或分布不均。涂片后需自然干燥或低温烘干，避免高温导致细胞形态改变。

三、固定与染色：增强细胞结构对比度

固定与染色是提升细胞辨识度的关键步骤。推荐采用“快速固定+梯度染色”策略：血液涂片可用甲醇固定5—10秒，稳定细胞形态；组织切片或细胞学样本可采用4%多聚甲醛固定30分钟，保留抗原活性。染色需根据检测目标选择方案，如吉姆萨染色用于血细胞形态分析，巴氏染色用于宫颈细胞学检查，革兰染色用于细菌鉴别，抗酸染色用于结核杆菌检测。染色过程中需控制染料浓度与时间，避免过度染色导致背景模糊或细节丢失。

四、防污染与标准化操作：确保结果可复现

检验科需建立严格的防污染体系。操作时需佩戴无菌手套，使用一次性吸头与载玻片，避免样本交叉污染；涂片与染色区域需分开设置，配备紫外线消毒灯定期灭菌。在标准化操作中，需制定统一的涂片厚度、染色时间及观察流程，例如规定血液涂片厚度以“可见载玻片刻度”为标准，染色时间误差控制在±10秒内，确保不同检验人员的结果一致性。

五、环境控制与设备维护：保障检测稳定性

检验科显微镜需在恒温（20—25℃）、低湿度（<60%）环境中使用，避免温度波动导致镜头结雾或样本变形。同时需配置防尘罩与振动隔离台，减少粉尘沉降与机械震动对成像的影响。设备维护方面，需定期清洁物镜与目镜，使用专用擦镜纸避免划伤；定期校准光源亮度与滤光片性能，确保染色样本的色彩还原度。

通过系统化的样品制备流程，可显著提升检验科医用显微镜的检测精度与结果可靠性。检验人员需结合具体检测项目（如血常规、病理诊断、微生物检验），灵活运用上述技巧，实现从样本采集到形态分析的全流程优化，推动临床检验的高效开展与诊断质量的持续提升。